梯度PCR是指你的PCR儀在設(shè)置的時(shí)候可以同一時(shí)間不同位置設(shè)置一個(gè)從高到低的溫度梯度，以便在不知道退火溫度的情況下選擇一個(gè)最適宜的退火溫度。

        二實(shí)時(shí)熒光定量PCR是通過(guò)再PCR過(guò)程中摻入熒光染料或釋放熒光基團(tuán)，從而對(duì)模板進(jìn)行相對(duì)定量或絕對(duì)定量的實(shí)驗(yàn)，在實(shí)時(shí)熒光定量PCR時(shí)也可以設(shè)置梯度。

總的來(lái)說(shuō)實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種實(shí)驗(yàn)方法，而梯度PCR是一種實(shí)驗(yàn)手段。

1、常規(guī)PCR 技術(shù)：

對(duì)PCR 擴(kuò)增反應(yīng)的終點(diǎn)產(chǎn)物進(jìn)行定量和定性分析無(wú)法對(duì)起始模板準(zhǔn)確定量，無(wú)法對(duì)擴(kuò)增反應(yīng)實(shí)時(shí)檢測(cè)。

2、實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)：

利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化，通過(guò)Ct 值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的分析對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析